经过（guò）我们（men）多年生产实践栽培（péi）总结出来的（de）经（jīng）验是选用当（dāng）年表现优异的羊（yáng）肚菌（jun1）子实体进行组织分（fèn）离以（yǐ）后，再繁育出来的菌种进行栽培播种，由于（yú）转（zhuǎn）代次数（shù）少，变异性概率低（dī）。再进行播种，基本可以保（bǎo）障稳（wěn）定（dìng）的出菇率。综上所述（shù），掌握成熟的羊肚（dù）菌育种（zhǒng）技（jì）术是必要（yào）的。以（yǐ）下为大家详细的介绍羊肚菌菌种分离及提纯复壮（zhuàng）技（jì）术：
一（yī），选种菇  正（zhèng）常情况在清晨还没有浇（jiāo）水之（zhī）前（qián）采（cǎi）摘6分熟的，没有病害感（gǎn）染，虫害咬食的健康羊肚菌作为种菇，还要看菇形与（yǔ）其母本（běn）的（de）外观形（xíng）态相似度越高越好。采菇以后不要（yào）带（dài）土装入塑料（liào）袋（dài）中，根据（jù）不（bú）同品种写好标（biāo）签。
二，种菇处理  将（jiāng）采到的种菇（gū）进行测量，称重，并做好详细记录，测（cè）试种菇高，菌柄直径，菌帽直径，和菌帽高度。

三，准备工作  将制备好的PDA 培养基试管，无菌（jun1）水，储水罐，酒精棉，无菌棉摄子，酒精灯，火（huǒ）机，种菇等物品放到无菌操作台上，将杀（shā）菌灯（dēng）开好（hǎo），无菌风机（jī）同（tóng）时（shí）打开，20分钟（zhōng）后就可（kě）以进（jìn）行分（fèn）离羊肚菌菌种的操作了。也（yě）可以在接种箱中进行，把上述物品全（quán）部放入接种箱。接种箱封闭好以后用二氯异氰（qíng）悄酸纳薰蒸（zhēng）30分（fèn）钟（zhōng）即可开（kāi）始分离羊肚（dù）菌菌种的工作了（le）。

四，分离菌（jun1）种  1，带好手（shǒu）套，伸入无（wú）菌操作（zuò）台的无菌区（qū），或接（jiē）种箱（xiāng）内，先用（yòng）酒精棉球对双手手套外表进行彻底擦拭（shì）消毒，然后（hòu）用无菌水对羊肚（dù）菌种菇（gū）进行冲洗（xǐ）冲洗过程的水倒入储水罐中，内外（wài）都要冲洗，冲洗时间为2-3分（fèn）钟，冲洗以（yǐ）后用无（wú）菌（jun1）棉吸干羊（yáng）肚菌（jun1）表面水分（fèn）。然后（hòu）将攝子用酒精棉消毒（dú）处理（lǐ）以后，放在酒精灯火焰顺风（fēng）方（fāng）向（xiàng）燃烧消毒，再将羊肚菌菌帽与（yǔ）菌柄处（chù）掰（bāi）断，将菇帽部分放到（dào）一边，只用菌柄部分，再（zài）拿起一支试管（试管（guǎn）和（hé）菌柄同时用左手拿好，在酒（jiǔ）精灯火（huǒ）焰顺风处（chù）取（qǔ）下棉塞，棉塞夹在右（yòu）手中指和无（wú）名指之间，注（zhù）意塞（sāi）入试（shì）管部分的（de）棉塞向外，不要（yào）与手接触，右手的拇（mǔ）指（zhǐ）和食指拿摄子夹取菌柄与（yǔ）菌帽断开处的（de）3毫米（mǐ）见方的一块羊肚菌组织，接入试管（guǎn）斜面（miàn）培（péi）养基前（qián）端，塞好棉塞，放在（zài）旁边，注意始（shǐ）终保持试管培养基平面（miàn）向（xiàng）下（xià），轻（qīng）拿轻放（fàng）。然后再进行下一（yī）支试管（guǎn）的（de）操作。

五，培（péi）养（yǎng）  将分离好的菌种（zhǒng）贴好标签：标签内容包括日期，品（pǐn）种名（míng）称等信息。然后就（jiù）可以放在20-23度的条件下（xià）恒（héng）温培养。注意每（měi）天观察长势，杂菌感染严重的及时挑出。感染轻微的可以保留进（jìn）行提（tí）纯处理。

六，提（tí）纯  在分离的过程中，难（nán）免有杂菌感（gǎn）染（rǎn），根据羊肚（dù）菌（jun1）菌丝生长速度快（kuài）的特点，即使有羊（yáng）肚菌菌丝与杂菌共（gòng）同萌发生长（zhǎng），经过三天（tiān）培（péi）养，羊（yáng）肚菌（jun1）菌丝长势（shì）会超过杂菌一大（dà）截，遇到这种情况（kuàng）时就可（kě）以进（jìn）行提纯处理：
1，准（zhǔn）备工作：准备提纯的菌种，空PDA试管培养基，酒（jiǔ）精灯，酒精棉，接种钩，火（huǒ）机。消毒处理（lǐ）和上述方法一（yī）致。
2，提（tí）纯流（liú）程  戴好手（shǒu）套，用酒（jiǔ）精棉擦拭（shì）消毒，将接种钩擦拭消毒，然后在酒精灯火焰顺风方向取下等待提纯菌种试管棉塞，用接种（zhǒng）钩在酒（jiǔ）精（jīng）灯火焰处灼烧消毒处（chù）理以后将原来接入的（de）已经感染（rǎn）杂菌（jun1）的组织块（kuài）部位的培养（yǎng）基一同钩出试管，没有感染杂菌长有羊肚菌菌（jun1）丝（sī）的培养基保留1-2厘米即可。注（zhù）意接种（zhǒng）钩（gōu）尽量（liàng）不（bú）要（yào）接触到（dào）杂（zá）菌感染的部（bù）分。然后仔细对接种钩进行彻底消毒处理以后就可以取保（bǎo）留的（de）羊肚菌纯菌（jun1）丝接入（rù）新的PDA培养基中，大（dà）小以3毫米见方（fāng）一块为宜（yí）。然后将提纯后（hòu）的试管（guǎn）贴好标签，做好记录。再（zài）放到20-23度进行恒温培养（yǎng）。
七，菌（jun1）种保（bǎo）藏   分离，提纯（chún）好的（de）羊肚菌菌种以后需要及时进行菌种保藏处理，具体请参照菌种保藏方法 在适当的季（jì）节进行出（chū）菇栽培（péi）实验。